柱壓過(guò)高是HPLC柱用戶(hù)*常碰到的問(wèn)題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問(wèn)題,您可按下面步驟檢查問(wèn)題的起因。
1拆去保護(hù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問(wèn)題,若柱壓仍高,再檢查;2把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查。
3將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子,(此時(shí)不要連接檢測(cè)器,以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)性)。這時(shí),如果柱壓仍不下降,再檢查;
4更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說(shuō)明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請(qǐng)與廠商聯(lián)系。一般情況下,在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過(guò)濾器便可避免柱壓過(guò)高的問(wèn)題,SGE提供的Rheodyne 7315型過(guò)濾器就是解決這一問(wèn)題的*佳選擇。
我補(bǔ)充幾點(diǎn):
1:柱壓過(guò)高時(shí)檢測(cè)的基本原理就是順著路線走向檢查各個(gè)“路口”,包括從流動(dòng)相走出的通路,三通,兩通都要檢查,因?yàn)槿绻?jīng)使用過(guò)緩沖溶液和鹽做流動(dòng)相,沒(méi)有維護(hù)好的話,會(huì)對(duì)各個(gè)通路造成影響,極有可能腐蝕有些零件中的小附件,比如一些墊片,需要及時(shí)更換;
2:檢測(cè)柱子的話,有些朋友都回答了很多了,我就補(bǔ)充一點(diǎn),如果發(fā)現(xiàn)是預(yù)柱堵的話,可以用超聲(加純乙醇,甲醇)一段時(shí)間,可以恢復(fù)
至于能不能用純水沖洗,應(yīng)該由柱子決定,影響柱壓的*基本因素就是流動(dòng)相的粘度,純物質(zhì)的粘度*低,但是一般不建議用純水常時(shí)間沖洗,用高濃度有機(jī)相較好。柱子使用完畢也應(yīng)該按照說(shuō)明書(shū)的用純?nèi)軇┍4妗?/span>
3:如果確定柱子沒(méi)有問(wèn)題,是系統(tǒng)的問(wèn)題,就需要用純水常時(shí)間沖洗一下系統(tǒng)
4:柱子和系統(tǒng)都沒(méi)有問(wèn)題的話,就是檢測(cè)器的問(wèn)題,很有可能是檢測(cè)池堵了,嘗試一下不接柱子,光連檢測(cè)器看看,就會(huì)發(fā)現(xiàn)了。如果是檢測(cè)池堵了,那按照你檢測(cè)池的說(shuō)明,一個(gè)一個(gè)零件卸下來(lái),有順序的,而且要非常小心,一個(gè)不小心,你就裝不回去了。把可以清洗的部件超聲一下。有些象石英之類(lèi)的是不能超聲的!
5:*后也是*慘的,就是你的檢測(cè)器壞了,或者到了使用的壽命了,也會(huì)出現(xiàn)莫明其妙的不正常柱壓!
注意樣品的處理,以及流動(dòng)相的處理,其次就是如果你的柱子原來(lái)是甲醇或乙腈保存,現(xiàn)在要用含緩沖鹽流動(dòng)相,應(yīng)該先用乙腈/水(15/85)或甲醇/水(15/85)類(lèi)似比例沖柱子,短柱20~30分鐘,長(zhǎng)柱40分鐘以上,然后在走流動(dòng)相,不然,想想看,結(jié)果柱壓也是一樣越來(lái)越高的。